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你知道固相萃取的操作步骤及其使用特点吗

点击次数:126 发布时间:2022-02-23

  固相萃取(SPE)是利用固体吸附剂将样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离和和富集的目的。先使样品通过一装有吸附剂(固相)小柱,保留其中某些组分,再选用适当的溶剂冲洗杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱,从而达到快速分离净化与浓缩的目的。

  固相萃取的操作步骤:

  针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质),操作稍有不同。

  目标化合物保留模式

  固相萃取操作一般有四步:

  ①活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。

  ②上样----将样品用一定的溶剂溶解,转移入柱并使组分保留在柱上。

  ③淋洗----Z大C度除去干扰物。

  ④洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。(注意流速不要过快)

  杂质保留模式:

  固相萃取操作一般有三步:

  ①活化----除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。

  ②上样----将样品转移入柱,此时大部分目标化合物会随样品基液流出,杂质被保留在柱上,故此步骤要开始收集。

  ③洗脱----用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集,合并收集液。(注意流速不要过快)

  固相萃取(SPE)使用特点:

  样品溶液体系性质要与固相萃取要求相适应。例如:在C18吸附待测化合物的模式中,样品溶液体系中有机溶剂的比例不能太高;在C18吸附样品基质的模式中,样品溶液体系中有机溶剂的比例不能太低。

  要注意填料承载能力,防止上样超载导致检测结果不准确。

  过柱流速要合适,不能过快或过慢,特别是样品溶液上柱和洗脱两个环节的过柱速度要控制。一般过柱流速为1~3mL/min。

  对于使用硅胶基质的SPE小柱在样品溶液上柱前不能干涸。如果干涸了应该重新对小柱进行活化。

  
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